Tinció de Gram o també coneguda com coloració de Gram és el nom que rep un tipus de tinció diferencial que s'empra en l'àrea de la bacteriologia per poder visualitzar els bacteris, especialment en les mostres clíniques. El nom d'aquesta coloració es deu a l'bacteriòleg danès Christian Gram, que va ser responsable de desenvolupar la tècnica en l'any 1884. Gram tenia com a principal objectiu aconseguir una prova que li permetés diferenciar diversos grups de bacteris per d'aquesta manera poder estudiar-les i elaborar una classificació de les mateixes. Els experiments de Gran van resultar ser tot un èxit i de forma ràpida s'establiria com una de les principals tècniques utilitzades per a l'estudi dels bacteris, ja que permetia poder identificar-les de manera ràpida i efectiva en una infecció i seleccionar l'antibiòtic que sigui més d'acord per tractar aquesta infecció.
El procediment per a realitzar una tinció és el següent: el primer és prendre la mostra de bacteris que es busca pintar, després amb un hisop s'ha d'estendre en un portaobjectes i després s'ha de deixar assecar a temperatura ambient o, si no utilitzar un encenedor, tenint especial cura per no cremar els bacteris. Després d'això s'ha de fixar la mostra al portaobjectes utilitzant per a això metanol durant aproximadament 1 minut.
Posteriorment es col·loca el tint de color violeta de genciana al portaobjectes i es deixa reposar per 1 minut. És important destacar que aquest colorant té la capacitat de traspassar qualsevol tipus de paret bacteriana i és per això que pot tenyir tant bacteris Gram positives com negatives. Posterior a això s'ha d'esbandir la mostra amb aigua i seguidament afegir Lugol, de manera que aquesta substància cobreixi tota la mostra i s'espera durant un minut. El lugol és un compost que està conformat en gran part per iode que en aquest cas és el responsable de fixar el colorant violeta de genciana a la mostra.
Després dels passos abans descrits el portaobjectes s'ha de rentar amb una barreja d'alcohol i acetona durant un període aproximat de 30 dies, és en aquest pas, quan realment acaba la tinció de Gram, això es deu al fet que la barreja d'alcohol i acetona es s'encarrega de dissoldre els complexos de lugol i violeta de genciana.
